Her insan gibi embriyolar da farklıdır ve her zaman ayni hızda bölünmezler. Büyük bir kısmı 5. gün blastosist aşamasında ulaşırken küçük bir kısmı da 6. gün ve çok nadir de olsa bazı embriyolar 4. ve 7. gün blastosist aşamasına ulaşıyorlar. Blastosislerin yaklaşık 64%’i 5. gün bu asamaya ulaşırken, 34 %’ü 6. gün oluşmaktadır. Beklendiği üzere embriyonun blastosist aşamasına 6. günde ulaşması, hücre bölünme hızının ve hücrelerin organize olma zamanlamasının 5. günde ulaşan embriyolara göre gecikmiş olması demektir. 5. gün embriyoları ortalama 112 saat içinde genişlemiş blastosist olurken, 6. gün embriyoları yaklaşık 132 saat içinde bu aşamaya erişir. Bu ekstra gecikme sırasında iç hücre kitlesi ve trofektoderm puanlarında da düşüş görülür (PMID: 37381073).
6. gün blastosistleri 5. günden ayıran diğer bir gözlem de erken bölünme evrelerinde (2–8 hücre aşamaları) 6. gün embriyolarında düzensiz bölünmeleridir. Bu da hücrelerin eş zamanlı bölünmesini zorlaştırır ve metabolik talepleri artırarak embriyonun genel canlılığını azaltır. Tüm bu küçük farklılıklar (gecikmiş hücre sayısı, daha düşük ICM ve TE kalite puanları, artmış bölünme aksaklıkları) bir araya geldiğinde, 6. gün blastosistlerinin rahme tutunma ve canlı doğum oluşturma oranlarında yaklaşık %10–20 oranında bir düşüş gözlemlenir (PMID: 37381073; PMID: 32022423; PMID: 32849288). 5.gün embriyolarının yarıdan fazlası (%53) rahme tutunurken, 6. gün embriyolarının tutunma oranı yaklaşık % 44’dür. Canlı doğuma ulaşma oranı ise 5. gün embriyolarında %52 iken, 6. gün embriyolarında %33 olarak kaydedilmiştir (PMID: 32849288).
Diğer önemli bir konu da blastosist aşamasına ulaşmış embriyoların genetik durumu. Bildiğiniz üzere her blastosist euploid değildir. Kromozomal olarak normal (euploid) embriyoları seçmek için yapılan PGT-A testi uygulananlarda 6. gün blastosistleri biraz geride kalıyor. Bu durum endişe verici gibi görünse de 6. gün doğum ağırlığı ve boyu 5. gün transfer edilen doğanlardan farklı değil (PMID: 37381073). Ayrıca, embriyo ve rahim zamanlamasını uyumlu tutmak çok önemli. Dondurulmuş transfer sikluslarında, progesteron hazırlığını beş gün (P + 5) yaptıktan sonra 6. gün embriyolarını transfer etmek, altıncı gün (P + 6) transferine kıyasla çok daha iyi sonuç veriyor (PMID: 33428126).
6. gün embriyolarının tutunma ve canlı doğum şansı, 5. gün embriyolarına göre yaklaşık %10–20 daha düşük, euploid olsa bile. Kalite puanları biraz daha düşük ve erken hücre bölünmesi sırasında daha fazla aksaklık yaşanıyor; bu da başarı farkının büyük kısmını açıklıyor. Canlı doğan bebeklerin sağlığı ve ağırlığı açısından ekstra bir risk bulunmuyor. 6. gün blastosistini dondurmak ve bir sonraki siklusta (P + 5) çözdürüp transfer etmek rahim içi zar ile embriyo zamanlaması örtüşmesine zemin hazırlar.